□ 吴海燕
结直肠癌是全球范围内最常见的消化系统疾病之一，其发病率和死亡率正在逐渐上升。因早期的结直肠癌具有较高的治愈率，晚期则会降低生存率。为此，早期诊断和发现对于预防结直肠癌至关重要。近年来，随着医学技术的不断发展，研究人员探索了许多实验室生物标志物，能够为发现早期结直肠癌提供线索。下面，就为大家科普一下关于结直肠癌实验室生物标志物的知识。
1、什么是结直肠癌？
作为一种常见的消化道恶性肿瘤，结直肠癌起源于大肠黏膜上皮细胞，并通常经历从腺瘤到癌变的过程。在发病过程中，肠道内的腺瘤细胞受到各种内外因素的影响，如遗传、环境、生活习惯等，导致基因突变，从而使正常细胞逐渐演变成癌细胞。结直肠癌的发展过程通常分为三个阶段：腺瘤阶段、癌前病变阶段和癌变阶段。腺瘤阶段是结直肠癌的早期，此时肿瘤较小，症状不明显。随着病程的进展，肿瘤逐渐增大，进入癌前病变阶段，患者可能会出现轻微的症状，其中包括排便习惯改变、腹痛等。最后，肿瘤进一步发展，进入癌变阶段，症状加重，其中包括腹胀、便血等。
2、什么是生物标志物？
生物标志物主要指存在于生物体内部，可以反映生物体生理、病理状态的相关指标，具有客观性、可测量性等特点。在结直肠癌的诊断中，实验室生物标志物可以帮助医生发现患者的病情，预测疾病的发展趋势，评估治疗效果，以及监测疾病的复发。
3、结直肠癌实验室有哪些生物标志物？
结直肠癌是全球发病率较高的恶性肿瘤之一，对人类健康构成严重威胁。在结直肠癌的实验室检查当中，生物标志物有很多，其中比较常见的有糖类抗原199、125以及癌胚抗原等。其中，糖类抗原199是一种低聚糖肿瘤糖类蛋白质，主要存在于胰腺、胃部、肝脏和胆管等部位。在结直肠癌实验室中，糖类抗原199是一种常见的生物标志物。升高的情况主要与结直肠癌的早期诊断、预后和治疗效果相关。此外，糖类抗原199的水平还可以用于监测治疗过程中的疗效。糖类抗原125是一种糖蛋白性肿瘤抗原，主要来源于胃癌和卵巢细胞。然而，在结直肠癌等恶性肿瘤中也会存在。糖类抗原125的升高程度并不能直接说明结直肠癌的诊断，需要结合其他临床指标进行综合评估。癌胚抗原（CEA）是一种广谱性肿瘤标志物，富含多糖的蛋白复合物。在正常情况下，癌胚抗原存在于胎儿结肠上皮和成人的消化道上皮中。然而，在结直肠癌患者体内，癌胚抗原的表达量会升高。因此，癌胚抗原可用于结直肠癌的筛查、诊断和预后评估。
除了以上提到的生物标志物外，还有许多其他生物标志物在结直肠癌的诊断、治疗和预后评估中具有一定的临床价值。其中包括甲胎蛋白（AFP）、胚胎抗原（CEA）、前列腺特异性抗原（PSA）等。需要注意的是，单一生物标志物的升高并不能确诊结直肠癌，而是需要结合多个生物标志物、影像学检查和病理检查等多方面的信息进行综合判断。
4、结直肠癌实验室生物标志物有哪些检测方法？
实验室检测结直肠癌生物标志物的方法多种多样，主要包括免疫组化、聚合酶链式反应以及二代测序法。
免疫组化法是一种重要的生物标志物检测手段，其主要作用是通过特异性抗体与生物标志物的结合，对肿瘤的类型、分级和分期进行判断。这种方法的原理是利用抗原与抗体的特异性结合，识别组织中的抗原。在结直肠癌的检测中，通常需要检测四种生物标志物，包括MLH1、MSH2、MSH6和PMS2。这四种蛋白在正常组织中呈阳性，大多数结直肠癌患者的细胞核中也能检测到。如果其中一种蛋白缺失，就可以判断为错配修复基因突变。尽管免疫组化法操作方便，几乎所有病理科都可以实施，但是由于其主观性较强，容易受到检测过程、抗体质量等因素的影响，导致不同中心的检测精度存在差异。
聚合酶链式反应（PCR）技术早期主要应用于亲子鉴定分型，目前在结直肠癌监测中，主要用于检测五个微卫星位点，通过判断片段长度或峰形是否存在异常，从而判断肿瘤的稳定性。随着PCR技术的发展，许多检测不再需要正常组织对照，可以直接检测微卫星状态。通过对比肿瘤样本和对照样本，如果所有微卫星位点都没有扩增片段大小改变，说明微卫星较为稳定；如果有一个或多个微卫星位点存在扩增片段大小改变，则表示微卫星高度不稳定。
二代测序法是一种全面检测多个基因位点和基因变异形式的技术。在一次检测中，可以检测到数十甚至上千个微卫星点，相比PCR技术，其检测范围更广。在结直肠癌实验室生物标志物检测中，二代测序法具有更高的精度，能为患者提供更多信息，同时有利于样本材料的保存。然而，二代测序法也存在局限性，如检测深度、基因选择等问题，以及在算法和阈值设定方面的差异。尽管如此，这些局限性并不影响二代测序法的检测精度。
结语：
总而言之，结直肠癌实验室生物标志物的探索和研究在早期发现、诊断和评估病情方面具有重要作用，同时对提高结直肠癌的治愈率和生存率也会具有现实意义。近些年，实验室生物标志物研究在结直肠癌领域取得了显著成果。未来，随着科学技术的不断发展，对结直肠癌实验室生物标志物的研究将更加深入，能够发现具有较高临床价值的生物标志物，进而为结直肠癌的确诊与治疗提供更多依据。
作者单位：北京市肛肠医院（北京市二龙路医院）检验科
