患者女性,63岁,因“发现甲状腺肿块20 d”入院。体格检查:右叶甲状腺可扪及一大小3 cm×2 cm肿块,甲状腺超声造影:右叶甲状腺见大小4.4 cm×3.0 cm不均质回声结节,TI-RADSⅣc级,边界不清,内部回声不均匀,彩色多普勒血流成像(color doppler flowing image,CDFI)检查,结节周边见血流信号环绕,考虑为甲状腺癌,不除外结节性甲状腺肿,右颈Ⅳ、Ⅵ区部分淋巴结结合超声造影疑转移,反应性增生待排除。遂行右叶甲状腺肿块及右颈Ⅳ区淋巴结细针穿刺活检(fine needle aspiration biopsy,FNAB),免疫组化检查结果示,肿瘤细胞平滑肌肌动蛋白、Vimentin为阳性,CD34、CK、S100、STAT6、TG均为阴性,Ki-67增殖指数约为70%。
众所周知,病理检查是判断异物性质的重要方式,从病人身上取下的标本都需要送病理科制成切片在显微镜下进行诊断。当我们取病理报告时,有的报告上会有“请来病理科联系免疫组化协助诊断”一行字。很多人一听要做免疫组化就方寸大乱,觉得要做这么多复杂的检查,自己的病是不是很严重啊?
什么是免疫组化?
在病理诊断中,免疫组化(IHC)是一种很重要的技术和手段。
免疫组化全称为免疫组织化学,是一种常用的实验技术,主要应用免疫学抗原和抗体特异性结合的基本原理,再通过化学反应使标记抗体的显色剂显色,从而对组织细胞内的抗原(主要为蛋白质)进行定性、定位及相对定量研究。
俗话,就是让抗原和抗体对一下暗号,使细胞里肉眼看不见的抗原愿意露出真面目,抗原表达的位置、强弱等可以辅助病理医生诊断。
为什么做免疫组化?
随着肿瘤防治关口前移成为各界共识,国家积极推行肿瘤早筛,很多肿瘤在早期被发现,穿刺活检标本也越来越多。这些仅仅几毫米的小标本中能得到的信息非常有限,再加上有时穿刺活检过程中物理损伤导致细胞变形,病理医生无法观察具体结构,就要通过免疫组化进行蛋白标记。
现代科技的发展推动越来越多的罕见疑难病被发现,在常规的肿瘤病理诊断中,约5%-10%的病例单靠传统的HE染色技术很难做出明确的形态学诊断,这就意味着这些病例需要做免疫组化。一些肿瘤医院这个数字甚至高达40%。
但并不是需要做免疫组化就证明一定得了癌症,也有可能是正常细胞或良性病变伪装起来跟我们开了个小玩笑。就算已经确诊是肿瘤,免疫组化也可以帮助病理医生诊断出肿瘤的分型,从而为患者找出最适合的治疗方案。
免疫组化的临床应用有哪些?
临床病理诊断工作中,免疫组化主要应用在如下几个方面:
①肿瘤良恶性的判断:常规病理HE切片看的是细胞形态和组织结构,多数情况下可以直接明确诊断;而免疫组化可以给细胞做特殊标记,明确肿瘤细胞的分型、分类。②确定肿瘤分期:肿瘤分期是判断预后的重要指标,与是否浸润、有无淋巴管或血管侵袭密切相关。这些在常规组织切片中有时很难判断,而免疫组化染色后可以比较清楚地观察到。③细胞属性的判定:通过特定抗体标记出细胞内相应的抗原成分,从而判定细胞的属性,确定肿瘤的来源。④确定来源不明的转移瘤的原发部位:转移瘤与原发瘤通常具有共同的抗原表达性,利用多种标记物对来源不明的转移瘤进行标记,进而推断转移来源。⑤对“未分化”恶性肿瘤进行分类:未分化恶性肿瘤在HE切片上由于肿瘤的“未分化”而缺少肿瘤细胞的起源特征,因此难以分类。这类肿瘤通常需要用一组抗体才能明确诊断。⑥进一步分类不同器官与组织形态学重叠的肿瘤。⑦及时准确地发现微小转移灶。⑧指导临床治疗方案及伴随诊断。
需要病人再次手术吗?
免疫组化是以病理切片为载体,在切片上做的。病人身上取下的标本送到病理科之后经过固定、取材、脱水、包埋等程序制成蜡块,可以长期保存,做免疫组化时只需从原来的蜡块上切片即可,不用再从病人身上获取组织,所以不需要病人再次手术。
免疫组化需要额外缴费?不包含在病检费用里面?
因免疫组化需要一抗、二抗等试剂及全自动免疫组化染色仪,成本昂贵,所以要额外收费,且收费较贵;并且不是所有患者都需要做免疫组化,病理医师需要阅片后判断是否需要做免疫组化,做哪些项目,根据需要做的项数累加后额外收费。部分疑难病例甚至要多次分批做免疫组化。所以,在接收标本的时候,无法一次收齐收取免疫组化费用。
什么时候出结果?
免疫组化步骤繁琐,大致十几步,制作过程大约需要一天时间,制片完成后由病理医师进行阅片,遇到疑难病理需要进行讨论,甚至还需补充一些免疫组化项目才能做出最终诊断,因此,需要等待几天才能得到最终结果,时间的长短根据病例难易程度而异。患者可以电话咨询结果是否出来,确定出来后到病理科领取纸质报告即可。
做了免疫组化一定会得到确切结果吗?
大部分普通病例,做了免疫组化后可以得到确切诊断,但有少数疑难的病例,由于病理形态不典型性或免疫组化局限性,只能得到一个倾向或者可能性诊断。进行相关分子学病理检查可能帮我们进一步明确诊断或找出更好的治疗方法。
众所周知,病理诊断是大部分疾病,尤其是肿瘤诊断的“金标准”。一份精准的病理报告包含很多内容,如果没有免疫组化的辅助,一部分病理报告就会不够完整,甚至会不准确。随着现代医学的发展,免疫组化、分子检测等技术使病理诊断更加科学严谨,从而为临床诊疗及判断疾病预后提供更加可靠的依据。
(作者单位:广西河池市人民医院)